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流式細(xì)胞術(shù)作為一種可在單細(xì)胞水平上對(duì)大量細(xì)胞進(jìn)行快速、準(zhǔn)確、多參數(shù)定量分析和分選的高技術(shù)；進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析的前提是樣品為單細(xì)胞懸液，根據(jù)不同實(shí)體組織成分的特點(diǎn)可選擇不同的分散細(xì)胞的方法，以期達(dá)到單細(xì)胞產(chǎn)量高、細(xì)胞損傷小的目的。

實(shí)體組織 溫和組織處理器 的制備方法有那幾點(diǎn) (1)機(jī)械法 1)用剪刀剪碎或者用鋒利的解剖刀剁碎組織; 2)將剪碎的組織加入勻漿器中勻漿; 3)用吸管或注射器抽吸細(xì)胞懸液，以分散細(xì)胞;

近期，Nature Methods發(fā)表了數(shù)篇關(guān)于大規(guī)模單細(xì)胞測(cè)序相關(guān)文章，包括文庫制備、測(cè)序方法、分析方法等，這里介紹其中的幾篇。

去年，Broad研究所的研究人員在《Science》上發(fā)表了一種稱為sNuc-Seq的單核RNA測(cè)序方法。

常規(guī)的轉(zhuǎn)錄組分析方法通常需要103個(gè)細(xì)胞，所以無法揭示單個(gè)細(xì)胞之間基因表達(dá)的異質(zhì)性，也難以對(duì)諸如早期胚胎及異質(zhì)性的組織干細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞等少量細(xì)胞進(jìn)行分析，而單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)的出現(xiàn)為此提供了有效的研究工具。

簡單回顧測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，從桑格爾發(fā)明雙脫氧末端終止法(一代測(cè)序)到人類基因組計(jì)劃歷時(shí)13年耗費(fèi)30億美元，測(cè)序一直很貴，直到高通量的邊合成邊測(cè)序技術(shù)(二代測(cè)序)出現(xiàn)。隨著測(cè)序

同一組織中的細(xì)胞往往被認(rèn)為是具有相同狀態(tài)的功能單位，因此傳統(tǒng)的測(cè)序技術(shù)分析的是細(xì)胞群體的總體平均反應(yīng)。

細(xì)胞作為生命結(jié)構(gòu)的基本單位，儲(chǔ)存大量的生物信息。細(xì)胞異質(zhì)性是生物組織的普遍特征，即使是相同類型的細(xì)胞受到周圍微環(huán)境的影響也會(huì)存在基因表達(dá)的差異[1]。